陈伟 吕达 宫帅
目的 探究卵巢癌细胞放疗抗性与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的关系。方法 构建A2780卵巢癌细胞放疗抵抗模型A2780R。采用平板克隆形成实验、CCK8实验检测细胞的放疗抵抗性,采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用细胞划痕和 Transwell侵袭迁移实验检测细胞迁移侵袭能力,采用Western blot和qRT-PCR实验检测细胞EMT相关蛋白和mRNA的表达。结果 与A2780细胞比,A2780R细胞的克隆体积大、数量多,细胞伸出伪足,与EMT的典型细胞形态类似。与A2780细胞比,A2780R细胞2 Gy细胞存活分数(survival fraction, SF2)、平均致死剂(mean lethal dose, D0)、准阈量(quasithreshold dose, Dq)、N增加(P<0.05),D0放射增敏比(sensitization enhancement ratio of D0, SERD0)、准阈量放射增敏比(sensitization enhancement ratio of Dq, SERDq)降低(P<0.05)。与A2780比,A2780R的凋亡率,E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白与mRNA表达减少,24 h和 48 h细胞迁移、24 h穿过Transwell膜和Matrigel胶细胞数量,钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白与mRNA、波形蛋白(Vimentin)蛋白与mRNA、Snail、p-Akt、p-GSK-3β蛋白增加(P<0.05)。结论 卵巢癌放疗抵抗细胞株A2780R发生EMT,其可能机制与激活Akt/GSK-3β/Snail信号通路相关。